一、检查与准备‌

1、在使用前，检查安全阀和放气阀螺丝旋钮是否完好，安全阀是否在校验期内，铅封是否完好。确认温度计和压力表是否完好，并在校验期内。确保排气管通畅，锅内水位达到水位指示线，检查灭菌锅内是否有杂物‌。

2、使用前应向高压蒸汽灭菌锅内加蒸馏水或煮开过的水，以尽量减少水垢的形成，从而保护设备并提高加热及灭菌效率。‌

‌二、操作步骤‌

‌    1、升压前的检查与准备‌：检查安全阀、放气阀、温度计和压力表是否完好，确保排气管通畅，锅内水位达到水位指示线，检查灭菌锅内是否有杂物‌。

‌    2、装料‌：在外层锅内加适量的水，将待灭菌物品放入内层锅，注意防止液体溢出，瓶塞不要紧贴桶壁，以防冷凝水沾湿棉塞‌。待灭菌的物品放置不宜过紧。

‌    3、加盖‌：将容器盖对准桶口，顺时针旋紧手轮，使容器盖与灭菌桶口平面完全密合‌。

‌    4、排气‌：开始加热至102℃，由温控仪控制的电磁阀自动放汽，排出灭菌锅内冷空气‌。

‌    5、保压‌：使锅内压力缓慢升高，当压力表指针达到所需压力刻度时，系统开始计时并维持压力至所需时间‌。

‌    6、降压‌：达到所需灭菌时间后，关闭电源，让锅内压力自然下降到零，再打开排气阀，排完余下的蒸汽后打开锅盖，取出灭菌物品‌。

7、已有微电脑自动控制的高压蒸气灭菌锅，只需放去冷气后，仪器即可自动恒压定时，时间一到则自动切断电源并鸣笛，使用起来很方便。

‌三、安全注意事项‌

‌    1、检查水位‌：每次使用前要检查水位，控制最低水位。水位要没及外层锅中的全部金属的加热圈外，还要留有多余水量，防止干烧造成对加热部件损坏‌。

‌    2、排气充分‌：确保冷空气充分排出，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭菌效果。

3、缓慢放气‌：达到灭菌时间后，不能立即通过放气阀快速放气，以免伤及实验人员或造成培养基上涌、喷出等现象‌。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。

4、降温后再开盖‌：当压强表数值降至接近0MPa时，不能立即打开锅盖。因为锅内仍有较高压强或高温蒸汽，可能引起烫伤或玻璃器皿炸裂，宜稍事降温后再开盖‌。

‌    5、定期检查与维护‌：设备使用中出现异常时，及时记录。每4到6个星期进行一次定期检查并做好记录。定期检查灭菌柜门关闭是否严密，如不严应更换密封垫。定期检查蒸汽压力表是否正常，做到每年校验一次。定期检查灭菌柜内加热器是否完好‌。

四、特别注意事项

1、何时打开锅盖？

在灭菌过程中，当压强表数值降至接近0MPa时，不能立即打开灭菌锅锅盖。因为锅内仍有较高压强，强行打开锅盖会使热空气喷薄而出，可能对实验人员造成伤害。此外，若灭菌锅内装有盛培养基的试管，突然减压可能使试管中的培养基喷出，造成棉塞被污染。

2、不得快速放气

达到灭菌时间后，不能立即通过放气阀快速放气。这样做可能伤及实验人员的手或面部，且对盛有培养基的试管也可能造成培养基上涌、喷出等现象。建议操作时在温度适当降低后再进行相应处理，或使放气阀部分开启缓慢放气。

3、压强为0时能否开盖？

当压强表上指针所指数值为0时，不能立即打开锅盖取出灭菌物品。尽管表上显示的压强值已是0，但此时高温蒸汽温度很高，可能引起烫伤。再者，若处于冬季室温很低的情况下，打开锅盖，冷空气的突然进入，还可能造成玻璃器皿炸裂，故宜稍事降温后再开盖。

4、最低水位控制？

每次使用前要检查水位，控制最低水位。水位除要没及外层锅中的全部金属的加热圈外，还要留有多余水量，防止干烧造成对加热部件损坏。

5、加什么水？

使用前应向高压蒸汽灭菌锅内加蒸馏水或煮开过的水，以尽量减少锅体内尤其是外层锅内加热圈上水垢的形成，从而实现对设备的保护，同时提高加热及灭菌效率。